肝素酶的原核表達(dá)與表達(dá)條件優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2015-09-07
【作者】 楊嫦嬌; 鄭麗燕; 吳文林;
泉州師范學(xué)院學(xué)報(bào) , Journal of Quanzhou Normal University,
2014年02期
【機(jī)構(gòu)】 泉州師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;
【摘要】 利用PCR技術(shù)從肝素黃桿菌克隆到肝素酶HepI基因,通過(guò)雙酶切將其克隆到原核表達(dá)載體pGEX-4T-2中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌E.coli BL21感受態(tài)細(xì)胞,獲得基因工程重組菌.12℃下IPTG誘導(dǎo)表達(dá)12h,Glutathione Sepharose 4B純化后獲得較高純度的HepI酶蛋白。